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tunel流式細(xì)胞凋亡檢測服務(wù)通常稱為細(xì)胞程序性死1亡,是由基因控制的主動性細(xì)胞死1亡過程。越來越多數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn),細(xì)胞凋亡與多種疾病密切相關(guān),如癌細(xì)胞具有連續(xù)增殖、抵抗細(xì)胞凋亡能力,利用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡可為腫1瘤診斷,療1效評價和預(yù)后預(yù)測提供了重要的參考指標(biāo)。

TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)細(xì)胞凋亡檢測試劑盒是用來檢測組織細(xì)胞在凋亡早期過程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況,其原理是生物素biotinylate標(biāo)記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以連接到凋亡細(xì)胞中斷裂DNA的3’-OH末端,并與連接辣根過氧化酶(HRP,horse-radish peroxidase)的鏈霉親和素streptavidin特異性結(jié)合,分子病理技術(shù)服務(wù),后者又與POD底物H2O2、二氨1基聯(lián)1苯1胺(DAB)產(chǎn)生深棕色反應(yīng),特異準(zhǔn)確地定位正在凋亡的細(xì)胞,因而在光學(xué)顯微鏡下即可觀察凋亡細(xì)胞;由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA斷裂,因而沒有3‘-OH形成,很少能夠被染色。本試劑盒適用于組織樣本(石蠟包埋、冰凍和超薄切片)和細(xì)胞樣本(細(xì)胞涂片)在單細(xì)胞水平上的凋亡原位檢測。還可應(yīng)用于抗腫1瘤藥的藥1效評價,以及通過雙色法確定細(xì)胞類型和分化階段。

滴加FITC-TSA:滴加FITC-TSA試劑,避光室溫反應(yīng)5min。后TBST洗3次×10min,PBS洗1次×5min。

DAPI復(fù)染核:切片滴加DAPI染液,避光孵育8min,沖洗后滴加抗熒光淬滅封片1劑封片。

鏡檢拍照:切片于尼康正置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像。(紫外激發(fā)波長330-380nm,發(fā)射波長420nm,發(fā)藍(lán)光;FAM(488)綠光激發(fā)波長465-495nm,發(fā)射波長515-555 nm,發(fā)綠光;CY3紅光激發(fā)波長510-560,發(fā)射波長590nm,發(fā)紅光。)

熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,F(xiàn)ISH)是在20世紀(jì)80年代末在性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非性分子細(xì)胞遺傳技術(shù),以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導(dǎo)分子(reporter molecule)結(jié)合,雜交后再通過細(xì)胞化學(xué)過程連接上熒光染料[1,2].FISH的基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標(biāo)記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯(lián)的單與探針分子特異性結(jié)合來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對定量分析.FISH具有安全、快速、靈敏度高、探針能長期保存、能同時顯示多種顏色等優(yōu)點,不但能顯示中期分裂相,還能顯示于間期核.同時在熒光原位雜交基礎(chǔ)上又發(fā)展了多彩色熒光原位雜交技術(shù)和染色質(zhì)纖維熒光原位雜交技術(shù).

分子病理技術(shù)服務(wù)-科銳諾(推薦商家)由武漢科銳諾生物科技有限公司提供。武漢科銳諾生物科技有限公司為客戶提供“外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術(shù)服務(wù)”等業(yè)務(wù),公司擁有“科銳諾”等品牌,專注于技術(shù)合作等行業(yè)。,在湖北省武漢市江夏區(qū)神墩四路666號武漢國英種子A棟1樓的名聲不錯。歡迎來電垂詢,聯(lián)系人:王經(jīng)理。

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