






原位雜交第三天
1) ? ? ? ?用1ml含10%熱滅清的MABT溶液置換溶液,放置搖床上25分鐘,然后用1mlMABT置換,25分鐘,再用1mlMABT溶液置換,一小時(shí)以上,后用1mlMABT溶液置換,25分鐘。
2) ? ? ? ?用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置五分鐘。
3)將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中,吸去staining buffer,加上300ul BM Purple AP Substrate(底物,用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上錫箔紙以避光,避免搖動,室溫下顯色。
4)每隔一小時(shí)觀察胚胎是否開始顯色
5)將顯色完全的胚胎中的底物吸出,用PBST洗兩三次后加上4%多聚甲醛固定,拍照。
6)4C冰箱保存。


原位雜交是一項(xiàng)非常重要的生物技術(shù),可以用于研究基因表達(dá)和調(diào)控,檢測基因變異和染色體異常,監(jiān)測細(xì)胞生長和凋亡,以及識別特定的細(xì)胞類型或組織。然而,它需要特殊的操作技術(shù)和設(shè)備,以及嚴(yán)格的對照實(shí)驗(yàn)才能獲得可靠的結(jié)果。
原位雜交(In Situ Hybridization)是指將特定標(biāo)記的已知核酸序列為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交,從而對特定核酸序列進(jìn)行定量定位的過程。這個技術(shù)可以用于研究細(xì)胞或組織中特定基因或DNA序列的表達(dá)和定位,從而幫助研究者深入理解和探究生物學(xué)過程。原位雜交有幾種不同的類型,包括熒光原位雜交和其他用于基因表達(dá)分析的方法。
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