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武漢科銳諾生物科技有限公司

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分子病理技術(shù)服務(wù)-科銳諾生物科技

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點(diǎn)對(duì)點(diǎn)酵母雙雜交驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)流程

1、誘餌蛋白毒性及自激1活檢測(cè)；

2、共轉(zhuǎn)化：分別將誘餌/捕獲質(zhì)粒（pGBKT7-Bait/pGADT7-Prey）、陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒（pGBKT7-p53/pGADT7-T）、陰性對(duì)照質(zhì)粒（pGBKT7-Lam/pGADT7-T）分別共轉(zhuǎn)到Y(jié)2H Gold感受態(tài)細(xì)胞中，涂布于DDO平板培養(yǎng)；

3、點(diǎn)板驗(yàn)證：分別從平板上挑單克1隆稀釋10倍、100倍、1000倍，然后點(diǎn)板到TDO/X/A和QDO/X/A固體培養(yǎng)基進(jìn)行驗(yàn)證；

4、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與報(bào)告整理。

分子病理診斷在遺傳性疾病的診斷和分型方面凸顯特長(zhǎng)，通過(guò)對(duì)患者染色體、基因的檢測(cè)進(jìn)行遺傳病篩查和診斷，并可對(duì)家族遺傳病的發(fā)生進(jìn)行預(yù)測(cè)。目前，分子病理技術(shù)服務(wù)，國(guó)內(nèi)主要通過(guò)染色體核型分析、熒光原位雜交技術(shù)、熒光定量PCＲ技術(shù)等檢測(cè)染色體畸形，輔助進(jìn)行產(chǎn)前遺傳性疾病的篩查。通過(guò)DNA直接測(cè)序、熒光定量PCＲ、免1疫組化技術(shù)等檢測(cè)相關(guān)基因的結(jié)構(gòu)、表達(dá)的變化，輔助進(jìn)行神經(jīng)系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等遺傳性疾病的診斷。

原位雜交第二天

1.

1）將探針回收，放于－20C保存（通常探針可重復(fù)使用十次左右）。

2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分鐘，重復(fù)一次。

3）置換2XSSCT1ml，60℃，放置15分鐘。

4）置換0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復(fù)一次。

2.

1）用MABT洗兩次，每次五分鐘，放在搖床輕輕搖動(dòng)。

2）室溫下加1ml 1：2：7溶液，時(shí)間為一小時(shí)。

3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶連，4C 冰箱過(guò)夜。

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