






植物組織原位雜交技術(shù)在植物基因表達和調(diào)控研究中具有廣泛的應用。它可以用來研究植物發(fā)育、生長、逆境響應等方面的基因表達模式和調(diào)控機制。例如,可以利用該技術(shù)研究植物中的轉(zhuǎn)錄因子、信號轉(zhuǎn)導通路、代謝途徑等基因的表達和調(diào)控。此外,植物組織原位雜交技術(shù)還可以用來鑒定植物中的病原體、檢測植物等方面。
總之植物組織原位雜交技術(shù)是一種重要的分子生物學技術(shù),可以用來研究植物基因的表達和調(diào)控。它具有操作簡便、結(jié)果可靠、應用廣泛等優(yōu)點,GISH,是植物分子生物學研究中不可或缺的工具。

把濾膜放在紙巾上于室溫晾干后,把濾膜(編號面朝上)放在一張保鮮膜上,并在保鮮膜上作幾個不對稱的標記,以使濾膜與性自顯影片位置對應。
用第二張保鮮膜蓋住濾膜。加光片并加上增感屏于-70℃曝光12-16小時。
底片顯影后,在底片上貼一張透明硬紙片。在紙上標記陽性雜交信號的位置,同時在不對稱分布點的位置上作出標記??蓮牡灼先∠峦该骷垼痹浑s交,通過對比紙上的點與瓊脂上的點來鑒定陽性菌落。

DNA 探針為原位雜交提供較高的靈敏度。與RNA探針相比,DNA探針與靶mRNA 分子的雜交強度較弱,因此在雜交后的洗滌中不應使用甲醛。
探針特異性至關(guān)重要。如果已知細胞中mRNA或DNA的確切核苷酸序列,原位雜交公司,則可據(jù)此設計高度的互補探針。如果超過 5% 的堿基對不互補,那么探針只能與靶序列發(fā)生輕度雜交。這意味著,探針更容易在洗滌和檢測步驟中被洗去,可能無法正確檢測。

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